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本品为广谱抗生素，对葡萄球菌、溶血性链球菌、炭疽杆菌、破伤风
梭菌和梭状芽孢杆菌等革兰氏阳性菌作用较强。对大肠杆菌、沙门氏菌、布鲁氏菌和巴氏杆菌等革兰氏阴性菌较敏感。本品对立克次体、衣原体、支原体、螺旋体、放线菌和某些原虫也有抑制作用。本品可治疗大肠杆菌或沙门氏菌引起的犊牛白痢、羔羊痢疾、仔猪黄痢和白痢、雏鸡白痢等；多杀性巴氏杆菌引起的牛出血性败血症、猪肺疫、禽霍乱等；支原体引起的牛肺炎、猪气喘、鸡慢性呼吸道病等。对血孢子虫感染的泰勒焦虫病、放线菌病、钩端螺旋体病等也有一定疗效。还可局部用于坏死杆菌所致的坏死、子宫蓄脓、子宫内膜炎等。
肌注后达峰时间为30分钟至数小时，取决于注射部位和容积。吸收后在体内分布广泛，易渗入胸、腹腔和乳汁，也能通过胎盘屏障进入胎儿循环，但在脑脊液的浓度低。土霉素主要以原形由肾小球滤过排泄，肾功能障碍时，排泄减慢，半衰期延长。
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